В наших исследованиях при изучении седиментационных и плотностных характеристик РНК вируса ВЭЛ установленно, что РНК, экстрагированная из очищенной вирусной суспензии после центрифугирования в 10/30% градиенте сахарозы и в градиенте плотности сернокислого цезия имеет коэффициент седиментации 38-40 S и распределяется в одной зоне с плавучей плотностью 1.66 г/см³, что отчетливо видно на рис. 1 и 2.

   Для изучения электрофоретического профиля вирионной РНК и определения ее молекулярного веса соответствующие РНК-содержащие фракции сахарозного градиента объединяли, повторно экстрагировали фенолом и исследовали путем электрофореза в 3.5% полиакриламидном геле (рис. 3). На представленной электрофореграмме отчетливо видно, что вирионная 40 S РНК гомогенна и свободна от каких-либо примесей. Молекулярный вес вирионной РНК рассчитывали в сравнении с электрофоретической подвижностью маркерных 28 и 18 S ¹⁴С-уридин РНК. Подсчитанный таким образом молекулярный вес вирионной РНК вируса ВЭЛ оказался равным 4.3 × 10⁶ дальтон. Надо сказать, что при расчете молекулярного веса РНК по формуле МВ = 1550 × S^2.1, где S - коэффициент седиментации, получали значения, близкие к таковым, определенным при помощи электрофореза РНК в полиакриламидном геле. В то же время седиментационный анализ РНК, выделенной из клеток ФКЭ, инфицированных вирусом ВЭЛ, обработанных актиномицином Д и инкубированных с ³Н-уридином, показал, что вирус ВЭЛ индуцирует в клетках куриных эмбрионов синтез трех основных типов РНК с коэффициентами седиментации 40, 26, и 20-22 S. Первая из них РНК с коэффициентом седиментации 40 S аналогична вирионной РНК и чувствительна к действию РНК-азы, вторая, вновь синтезированная РНК с коэффициентом седиментации 26 S, также чувствительна к РНК-азе и большинством исследователей рассматривается в качестве репликативной промежуточной формы РНК, хотя ее функция до настоящего времени окончательно не выяснена. И наконец последний вид РНК, выявленной нами при седиментационном анализе вирусиндуцированной РНК-РНК с коэффициентом седиментации 20-22 S, - резистентная к действию РНК-азы и обозначенная как репликативная форма РНК (рис. 4). Фракционирование вирусиндуцированной РНК в градиенте плотности сернокислого цезия показало, что РНК распределяется в двух зонах с плавучей плотностью 1.66 и 1.60 г/см³.

   Ранее было обнаружено, что олигорибонуклеотиды и олигодезоксирибонуклеотиды усиливают иммунный ответ у нормальных и облученных животных, активируют процессы пролиферации антителообразующих и других клеток. Биологическая активность ДНК и РНК была изучена при лечении таких заболеваний как центральная и периферическая тапето-ретинальная дистрофия, незаживающие трофические язвы различной локализации, при экспериментальном гепатите и аллоксановом диабете. Положительный эффект нуклеиновых кислот отмечался также при их воздействии на эспериментальные опухоли и др. [7-10].
   Сегодня инфекционные нуклеиновые кислоты выделены из многих ДНК- и РНК-содержащих вирусов. С целью выявления инфекционных свойств вируса ВЭЛ были изучены факторы, влияющие на инфекционные свойства РНК вируса: концентрация NaCl и время обработки клеток хлористым натрием для повышения проницаемости клеток для РНК, влияние ДЭАЭ-декстрана и протамин-сульфата на количество и размер бляшек, выявляемых под агаровым покрытием, время адсорбции РНК на клетках, чувствительность РНК к прогреванию и др.

   Для выявления инфекционности РНК нами модифицирован метод титрования инфекционности вирусов. Монослой культуры клеток ФКЭ обрабатывали 1 М раствора NaCl в течение 15 мин при 18-20^o С, в состав агарового покрытия добавляли 2-3 мг/мл ДЭАЭ-декстрана, а адсорбция РНК на клетках в отличие от вируса (30 мин) проходила в течение 3-5 мин при комнатной температуре или при 37^o С. Было установленно, что РНК, выделенная из очищенного вируса ВЭЛ с титром инфекционности 10¹⁰ БОЕ/мл обладает инфекционными свойствами, т.е способна при введении в организм лабороторных животных или в монослой культуры клеток вызвать инфекционный процесс, причем титры инфекционности РНК были в несколько раз ниже титров вируса - 10³-10⁴ БОЕ/мл.
   В отличие от вируса обработка РНК-азой полностью инактивировала инфекционные свойства РНК, а обработка РНК иммунной сывороткой против вируса ВЭЛ не оказывала влияния на бляшкообразование, вызываемое препаратами РНК. Аналогичные результаты были получены при обработке препаратов вируса и РНК трипсином. Кроме того обнаружено, что прогревание инфекционной РНК при 56^o не влияло на ее инфекционные свойства в отличие от вируса, который в этих условиях инактивировался уже через 2-3 мин. Инфекционная РНК, выделенная как из вируссодержащей суспензии, так и из инфицированных клеток, лучше сохраняет активность при хранении при - 20^o С, хотя и при - 10^o С она не теряет инфекционности в течение 7-10 дней.
   Данные по определению чуствительности РНК к действию различных ферментов, иммунной сыворотки и прогреванию свидетельствуют в пользу того, что инфекционность препаратов, полученных в результате фенольной депротеинизации вирусных частиц, принадлежит именно вирусной РНК, а не остаточному вирусу, что позволяет рекомендовать метод выявления инфекционной активности РНК вируса ВЭЛ для титрования инфекционности РНК, выделенных из альфа-вирусов (таблица).