УДК 661.732.9-611.81-599.323.4-616.379.608.64-771.74

   Исследования последних лет [1-4] продемонстрировали особенности регуляторных мехaнизмов, ответственных за нормальное функционирование эндокринного аппарата поджелудочной железы с участием Ca²⁺ и принимающих непосредственное участие в оптимизации медиаторных и гормональных систем регуляции клеточной активности [5,6], обусловленной во многом мессенджерной функцией этих ионов и кальциевых каналов [7-9] как мембраностабилизирующих факторов первостепенной важности. Показана важная регуляторная роль сверхмалых доз [10] кальциевого преципитата дрожжевой низкомолекулярной двуспиральной РНК (Ca²⁺-дс-РНК). Нормализующая роль этого физиологически активного соединения продемонстрирована при различных болезненных состояниях организма, в частности при болезнях крови [11-14], а также при аллоксановом диабете (АД) [15].
   Целью настоящего сообщения явилось изучение особенностей физиологической активности сверхмалых доз Ca²⁺-дс-РНК при более ограниченных сроках применения (10 дней) в комбинации с определенными дозами тиосульфата натрия (ТСН). Согласно научной информации последних лет [16-18] это соединение обладает ярко выраженной антиоксидантной активностью при различных экстремальных и патологических состояниях организма.
   Как показали наши наблюдения, хотя изолированное действие Ca²⁺-дс-РНК на протяжении 10 дней и характеризуется ярко проявляющейся тенденцией к восстановлению исходных показателей состава жирных кислот (ЖК) в мозговой ткани аллоксандиабетических белых крыс, тем не менее полученные данные продолжают демонстрировать статистически достоверные расхождения по сравнению с контролем и полностью нивелируются лишь спустя 20 дней после его применения. Дальнейшие исследования велись в направлении изучения особенностей комбинированного одноразового введения в течение дня сверхмалых доз Ca²⁺-дс-РНК (10^-12М) в сочетании с одновременной внутримышечной инъекцией 1 мл 10% раствора ТСН на протяжении 20 дней.
   Исследования проводили на 60 беспородных белых крысах-самцах массой 180-200 г. АД вырабатывали одноразовым внутримышечным введением аллоксана из расчета 15 мг/100 г массы тела. Животных декапитировали под легким эфирным наркозом на 10 день после введения аллоксана на фоне ярко выраженной и стойкой гипергликемии. Изолирование головного мозга, его очистку от оболочек и кровеносных сосудов, гомогенизирование, экстракцию ЖК проводили на холоду; их количественные колебания определяли на газовом хроматографе (Pay Uniкam, Англия).
   Как показали исследования (табл. 1), АД у белых крыс характеризуется развитием в мозговой ткани ярко выраженных расстройств изменением качественного состава и количественного содержания как насыщенных (НЖК) (пальмитиновой - С_16:0, стеариновой - С_18:0), так и ненасыщенных (ННЖК) (олеиновой - С_18:1, линолевой - С_18:2, линоленовой - С_18:3, арахидоновой - С_20:4) кислот. Это свидетельствует о глубоких структурных нарушениях фосфолипидного компонента мозговой ткани, развивающихся в результате максимально повышенной активности фосфолипазы А₂, катализирующей, как известно, реакцию деацилирования ННЖК с освобождением их большого количества, что в значительной степени констатируется при АД. Основная масса ННЖК вовлекается в реакции свободнорадикального окисления с образованием высоких концентраций продуктов переокисления, обладающих ярко выраженной мембранотоксической, а в далеко зашедших случаях и мембранолитической активностью. На фоне описанных расстройств накопившиеся в мозговой ткани неэстерифицированные НЖК в свою очередь вовлекаются в реакции ацилирования с лизопроизводными различных ФЛ-глицеридов, преимущественно лизофосфатидилхолинами. В результате имеет место замена НЖК на ННЖК - С_18:1, С_18:2, С_18:3 или С_20:4 с образованием так называемых "патологических разновидностей" ФЛ-глицеридов, что в свою очередь вносит значительный разнобой в реакции клеточного метаболизма. Понижение в результате отмеченных сдвигов содержания свободных НЖК в мозговой ткани приводит к заметному уменьшению при АД коэффициента отношения суммы НЖК к сумме ННЖК. Описанные расстройства в известной степени корректируются при 10-дневном одноразовом (в течение дня) применении Са²⁺-дс-РНК, хотя и полученные результаты продолжают статистически достоверно отставать от контрольных (табл.1).

                                                                                                                                    Таблица 1

                                Примечание: n=19; х-P < 0.001; xx-P < 0.01; без обозначений - данные статистически недостоверны.

   Примечательно, что изолированное 10-дневное применение ТСН в использованных концентрациях также не приводит к полному восстановлению исходных уровней в мозговой ткани животных с АД (табл. 2).

                                                                                                                                    Таблица 2

                                Примечание: n=19; х - P < 0.001; хх - P < 0.01; без обозначений - данные статистически недостоверны.

   Применение же Са²⁺-дс-РНК в сочетании с указанными дозами ТСН при том же 10-дневном сроке сопровождается восстановлением исходных уровней ЖК различных категорий (табл.3).

                                                                                                                                        Таблица 3

                        Примечание: n=19; х - P < 0.001; хх - P < 0.01; без обозначений - данные статистически недостоверны.

   Полученные результаты свидетельствуют о существовании важной синергической связи между эффектами двух испытанных нами физиологически активных соединений и служат основанием для интерпретации описанных феноменов с точки зрения участия указанных веществ в молекулярно-биологических преобразованиях систем регуляции клеточной активности. Они позволяют также рекомендовать разработанный нами метод комбинированной антиоксидантотерапии в условиях экспериментального АД для клинических испытаний.

   Институт молекулярной биологии НАН РА